大鼠elisa试剂盒显色淡、背景深问题解答
可能原因
显色淡,灵敏度偏低
解决方法
1、试剂盒在运输途中时间太长,温度太高 尽量缩短运输时间,夏季应放冰块降温
2、试剂盒未充分平衡 试剂盒从2~8℃冰箱取出后打开盒盖,于室温平衡至少20分钟,确保所有试剂已平衡至室温(约25℃)。
3、培养箱温度不足37℃ 注意培养箱温度,放入反应板后尽量减少开启次数以免影响温度恒定,非隔水式培养箱尤其应注意
4、保温时间不足 校正定时钟准确定时
5、洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增加 按说明书要求保留洗涤时间,准确记住洗涤次数
6、移液器吸液量不足,吸嘴内壁挂水太多或内壁不清洁 校正移液器,吸嘴要配套,装吸嘴时要紧密,吸嘴内壁要清洁,一次性使用 7、蒸馏水水质有问题 使用新鲜合格的蒸馏水 8、底物作用时间不足 准确定时
可能原因
背景深,全部呈有色,
解决方法
1、洗涤不充分,洗后未拍干,样品
中其它成分残留或酶标记物残留 浓缩洗液准确配制;10倍浓缩洗涤液如有结晶则应让结晶于室温全部溶解后再量取稀释;充分洗涤,*拍干。加样或加酶拍板的滤纸应弃去不用,不要反复使用,否则易造成污染
2、样品污染
样品应新鲜采集,或低温保存,防止污染 3、培养箱温度超过37℃或反应时间过长 调整培养箱温度,准确定时
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