百萤生物-Cy3 炔烃系列产品实验方案详情
cy3 炔烃是美国aat bioquest生产的荧光染料，各种花青3（cy3）染料已用于标记生物分子，用于荧光成像和其他基于荧光的生化分析。百萤生物是aat bioquest的中国代理商，为您提供优质的cy3 炔烃。
实验方案
操作方案
标记寡核苷酸
1.准备以下试剂：
200mmthpta [tris（3-羟丙基三唑基甲基）胺]水溶液
100mm cuso4水溶液
炔烃修饰的低聚水溶液（尽可能浓缩，例如>10 mg / ml）
100 mm抗坏血酸钠水溶液
10 mm染料叠氮化物水溶液或dmso溶液（有关推荐的溶剂，请参阅我们的网站）
2.在反应前将cuso4与thpta以1：2的比例混合并充分涡旋几分钟。该溶液在冷冻时可稳定数周。
3.向炔烃改性的低聚物溶液中加入过量的染料叠氮化物（摩尔比为2-5当量）。
4.加入5当量的thpta / cuso4工作溶液（来自步骤1）。
5.加入10-30当量的抗坏血酸钠。
6.在室温下搅拌，涡旋或摇动反应混合物30-60分钟。
7.沉淀或纯化寡聚物。
标记肽
1.准备以下试剂：
200 mm thpta配体水溶液
100mm cuso4水溶液
炔烃修饰肽水溶液或dmf溶液（取决于您的肽溶解度，如果可能，> 10 mg / ml）
100 mm抗坏血酸钠水溶液
10 mm染料叠氮化物水溶液或dmso溶液（有关推荐的溶剂，请参阅我们的网站）
2.在反应前几分钟以1：2的比例孵育cuso4与thpta配体。 该溶液在冷冻时可稳定数周。
3.向炔烃修饰的肽溶液中加入过量的染料叠氮化物（摩尔比为5-10当量）。
4.加入5-10当量的thpta / cuso4。
5.加入10-20当量的抗坏血酸钠。
6.在室温下搅拌，涡旋或摇动反应混合物30-60分钟。
7.通过hplc纯化您想要的肽。
标记炔烃有机小分子
1.准备以下试剂：
200 mm thpta配体水溶液
100mm cuso4水溶液
炔烃化合物水溶液或dmf溶液（取决于您的化合物溶解度，如果可能，> 10mg / ml，）
100 mm抗坏血酸钠水溶液
10 mm染料叠氮化物水溶液或dmso溶液（有关推荐的溶剂，请参阅我们的网站）。
2.在反应前几分钟以1：2的比例孵育cuso4与thpta配体。当冷冻时，该溶液可稳定数周。
3.向炔烃溶液中加入过量的染料叠氮化物（摩尔比为5-10当量）。
4.加入25当量的thpta / cuso4。
5.加入50当量的抗坏血酸钠。
6.在室温下搅拌反应混合物30-60分钟。
7.通过色谱或其他方法纯化您想要的分子。
标记生物聚合物
1.准备以下试剂：
200 mm thpta配体水溶液
100mm cuso4水溶液
炔烃改性的水中生物聚合物（尽可能浓缩，例如> 5毫克/毫升）
100 mm抗坏血酸钠水溶液
10 mm染料叠氮化物水溶液或dmso溶液（有关推荐的溶剂，请参阅我们的网站）。
2.在反应前几分钟以1：2的比例孵育cuso4与thpta配体。 该溶液在冷冻时可稳定数周。
3.向炔烃改性的生物聚合物溶液中加入过量的染料叠氮化物（负载比：5-20染料叠氮化物/炔烃）。
4.加入5摩尔当量（参考染料叠氮化物）的thpta / cuso4。
5.加入10当量的抗坏血酸钠（参见染料叠氮化物）。
6.在室温下搅拌，涡旋或摇动反应混合物30-60分钟。
7.通过凝胶过滤或透析纯化您想要的分子。
标记细胞，细胞裂解物或生物样品
1.准备以下试剂：
100mm thpta配体水溶液
20mm cuso4水溶液
300mm抗坏血酸钠水溶液
2.5mm炔烃或叠氮化物标记试剂水溶液或dmso溶液
2.对于每个叠氮化物或炔烃修饰的细胞或细胞裂解物样品，将以下试剂加入1.5 ml微量离心管中，然后短暂涡旋混合。
50μl细胞或细胞裂解液样品
50μlpbs缓冲液
50μl5mm相应的染料叠氮化物水溶液或dmso溶液（或染料炔烃）检测试剂
3.加入10μl100mm thpta溶液，短暂涡旋混合。
4.加入10μl20mm cuso4溶液，短暂涡旋振荡。
5.加入10μl300mm抗坏血酸钠溶液以引发点击反应，短暂涡旋混合。
6.保护点击反应不受光照，使其在室温下孵育30分钟。
7.点击标记细胞或细胞裂解物并准备用于下游处理和分析。
图1所示。化学结构青蓝3炔(相当于cy3®炔]
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1.准备以下试剂：
200mmthpta [tris（3-羟丙基三唑基甲基）胺]水溶液
100mm cuso4水溶液
炔烃修饰的低聚水溶液（尽可能浓缩，例如>10 mg / ml）
100 mm抗坏血酸钠水溶液
10 mm染料叠氮化物水溶液或dmso溶液（有关推荐的溶剂，请参阅我们的网站）
2.在反应前将cuso4与thpta以1：2的比例混合并充分涡旋几分钟。该溶液在冷冻时可稳定数周。
3.向炔烃改性的低聚物溶液中加入过量的染料叠氮化物（摩尔比为2-5当量）。
4.加入5当量的thpta / cuso4工作溶液（来自步骤1）。
5.加入10-30当量的抗坏血酸钠。
6.在室温下搅拌，涡旋或摇动反应混合物30-60分钟。
7.沉淀或纯化寡聚物。
标记肽
1.准备以下试剂：
200 mm thpta配体水溶液
100mm cuso4水溶液
炔烃修饰肽水溶液或dmf溶液（取决于您的肽溶解度，如果可能，> 10 mg / ml）
100 mm抗坏血酸钠水溶液
10 mm染料叠氮化物水溶液或dmso溶液（有关推荐的溶剂，请参阅我们的网站）
2.在反应前几分钟以1：2的比例孵育cuso4与thpta配体。 该溶液在冷冻时可稳定数周。
3.向炔烃修饰的肽溶液中加入过量的染料叠氮化物（摩尔比为5-10当量）。
4.加入5-10当量的thpta / cuso4。
5.加入10-20当量的抗坏血酸钠。
6.在室温下搅拌，涡旋或摇动反应混合物30-60分钟。
7.通过hplc纯化您想要的肽。
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1.准备以下试剂：
200 mm thpta配体水溶液
100mm cuso4水溶液
炔烃化合物水溶液或dmf溶液（取决于您的化合物溶解度，如果可能，> 10mg / ml，）
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10 mm染料叠氮化物水溶液或dmso溶液（有关推荐的溶剂，请参阅我们的网站）。
2.在反应前几分钟以1：2的比例孵育cuso4与thpta配体。当冷冻时，该溶液可稳定数周。
3.向炔烃溶液中加入过量的染料叠氮化物（摩尔比为5-10当量）。
4.加入25当量的thpta / cuso4。
5.加入50当量的抗坏血酸钠。
6.在室温下搅拌反应混合物30-60分钟。
7.通过色谱或其他方法纯化您想要的分子。
标记生物聚合物
1.准备以下试剂：
200 mm thpta配体水溶液
100mm cuso4水溶液
炔烃改性的水中生物聚合物（尽可能浓缩，例如> 5毫克/毫升）
100 mm抗坏血酸钠水溶液
10 mm染料叠氮化物水溶液或dmso溶液（有关推荐的溶剂，请参阅我们的网站）。
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3.向炔烃改性的生物聚合物溶液中加入过量的染料叠氮化物（负载比：5-20染料叠氮化物/炔烃）。
4.加入5摩尔当量（参考染料叠氮化物）的thpta / cuso4。
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3.加入10μl100mm thpta溶液，短暂涡旋混合。
4.加入10μl20mm cuso4溶液，短暂涡旋振荡。
5.加入10μl300mm抗坏血酸钠溶液以引发点击反应，短暂涡旋混合。
6.保护点击反应不受光照，使其在室温下孵育30分钟。
7.点击标记细胞或细胞裂解物并准备用于下游处理和分析。
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