9个步骤学会淀粉酶试剂盒的使用方法

淀粉酶试剂盒是用于体外测定人体血清或尿液中淀粉酶含量及活力的检测仪器。人血清α-淀粉酶主要来源于胰腺和唾液腺,其测定是急性胰腺炎的主要诊断指标。
淀粉酶试剂盒的使用方法:
1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50μl于反应孔内。
3.加入稀释好后的标准品50μl于反应孔、加入待测样品50μl于反应孔内。立即加入50μl的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5.每孔加入80μl的亲和链酶素-hrp,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7.每孔加入底物a、b各50μl,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8.取出酶标板,迅速加入50μl终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9.在450nm波长处测定各孔的od值(opticaldensity:吸光度)。
如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
关键词:洗板机

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